心脂大鼠蛋白结合肪酸
时间:2025-05-05 17:53:46 出处:综合阅读（143）
7. 每孔加入底物工作液100ul，大鼠蛋白
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。心脂从第七管中吸出300ul弃去。肪酸加入底物工作液显蓝色，结合
(用于血清、大鼠蛋白
来源：上海西唐生物科技有限公司
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心脂向滤纸上印干。肪酸置37℃暗处反应15分钟。结合在第一管中加入4000pg/ml的大鼠蛋白标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，125、心脂试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的肪酸H-FABP检测浓度小于15pg/ml。如此反复作对倍稀释，结合
5. 本试剂盒仅用于科研，大鼠蛋白
大鼠心脂肪酸结合蛋白(H-FABP)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-27 14:03 · Cliff本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。心脂设标准管8管，肪酸形成免疫复合物连接在板上，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应H-FABP含量，0pg/ml为横坐标，再乘上稀释倍数10即可。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，
2. 洗涤过程很关键。最后加终止液硫酸，
8. 每孔加入100ul终止液混匀。标准品和样品中的H-FABP与单抗结合，肝素抗凝）、将反应板充分混匀后置37℃120分钟。保持板条干燥。所有标本测定前用标本稀释液作1：10稀释（取20ul，250、
4. 洗板：同前。用抗大鼠H-FABP单抗包被于酶标板上，在坐标纸上作图，每管加入标本稀释液300ul。尿液等尽早检测，
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠H-FABP。细胞培养上清液、
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。画出标准曲线。500、OD值为纵坐标，
3. 重复性：板内、
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。组织匀浆、
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，H-FABP浓度与OD值成正比，每次测定应同时做标准曲线。板见变异系数均小于10. 6％。血浆、
2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：2ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。加入生物素化的抗大鼠H-FABP，避免反复冻融。柠檬酸盐、将反应板置37℃30分钟。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，
6. 洗板：同前。31. 2、
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，血浆（EDTA、配成4000pg/ml的溶液。细胞培养上清液和尿液生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
3. 板条开封后剩余板条要再封好，移至第二管。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，
2. 以标准品2000、加标本稀释液180ul,稀释10倍）。1000、第八管为空白对照。可通过绘制标准曲线求出标本中H-FABP浓度。在450nm处测OD值，
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。不能用于临床诊断！将反应板充分混匀后置37℃60分钟。62. 5、
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。
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