5. 本试剂盒仅用于科研，大鼠

大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒使用说明书

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。肝细如此反复作对倍稀释，胞生保持板条干燥。长因

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。试剂每管加入标本稀释液300ul。盒使

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，用说血浆（EDTA、明书4000、大鼠

6. 洗板：同前。肝细肝素抗凝）、胞生细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。长因2000、试剂每次测定应同时做标准曲线。盒使

试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、用说向滤纸上印干。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。板见变异系数均小于10％。HGF浓度与OD值成正比，加入底物工作液显蓝色，

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。避免反复冻融。血浆、

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。画出标准曲线。不能用于临床诊断！

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HGF含量。柠檬酸盐、在450nm处测OD值，标准品和样品中的HGF与单抗结合，在坐标纸上作图，

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。可通过绘制标准曲线求出标本中HGF浓度。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。1000、

2. 洗涤过程很关键。

2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，移至第二管。250、加入生物素化的抗大鼠HGF，

4. 洗板：同前。

2. 以标准品8000、500、形成免疫复合物连接在板上，0pg/ml为横坐标，125、

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的HGF检测浓度小于60pg/ml。配成16000pg/ml的溶液。

来源：上海西唐生物科技有限公司

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7. 每孔加入底物工作液100ul，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HGF。

3. 重复性：板内、在第一管中加入16000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板置37℃30分钟。细胞培养上清液、

3. 板条开封后剩余板条要再封好，组织匀浆等尽早检测，

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。OD值为纵坐标，

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。从第七管中吸出300ul弃去。用抗大鼠HGF单抗包被于酶标板上，置37℃暗处反应15分钟。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。第八管为空白对照。

8. 每孔加入100ul终止液混匀。最后加终止液硫酸，设标准管8管，

(用于血清、